Técnicas Avançadas de Espermograma

Tópicos Teóricos (4h)

• Indicações do espermograma e preparo da amostra – abstinência, coleta por masturbação e importância do tempo para análise
• Critérios da OMS para normalidade
• Análise macroscópica do sêmen – parâmetros (cor, volume, viscosidade, pH, tempo de liquefação) e interpretação de resultados
• Análise microscópica – técnicas de contagem em câmaras, avaliação da motilidade (tipos A, B, C, D), concentração, vitalidade e morfologia estrita de Kruger
• Testes de vitalidade e integridade de membrana – princípios do teste de eosina-nigrosina e do teste hiposmótico; quando solicitá-los e como interpretar
• Identificação de células redondas e teste de peroxidase – diferenças entre espermatogônias e leucócitos; uso da coloração peroxidase para detectar granulócitos
• Morfologia estrita de Kruger – critérios para cabeça, peça intermediária, cauda e acrossoma; importância da morfologia para prognóstico; valores de referência (≥ 4 % formas normais)
• Testes complementares:
  • Fragmentação do DNA espermático: causas, indicação do teste TUNEL/citometria de fluxo, interpretação dos resultados e impacto na fertilidade
  • Tecnologia ZyMot: princípios da microfluídica, indicações (oligozoospermia, astenozoospermia, alta fragmentação), comparação com métodos de centrifugação
• Relevância clínica dos resultados – classificação de alterações (oligozoospermia, astenozoospermia, teratozoospermia), relação com patologias como varicocele e infecções, e encaminhamento para técnicas de reprodução assistida (IIU, FIV, ICSI)

Tópicos Práticos (4h)

• Coleta e processamento da amostra – demonstração de salas de coleta, instruções ao paciente, registro de dados e manuseio da amostra
• Avaliação macroscópica passo a passo – medição de volume e tempo de liquefação, avaliação de viscosidade, cor e pH
• Preparação para análise microscópica – homogenização, carregamento de câmaras (Makler), classificação da motilidade (tipos A–D)
• Contagem de concentração e cálculo do número total de espermatozoides – exercício prático com câmaras de contagem
• Testes de vitalidade – execução do teste de eosina-nigrosina: preparação do esfregaço, contagem de espermatozoides vivos e mortos
• Teste de peroxidase para células redondas – preparo do reagente, coloração da amostra e diferenciação entre leucócitos e outras células
• Morfologia estrita (Kruger) – preparação e coloração do esfregaço (Shorr ou Papanicolaou), uso de microscópio com imersão (1 000 ×), identificação de alterações de cabeça, peça intermediária e cauda, cálculo do percentual de formas normais
• Aplicação de técnicas complementares:
  • Seleção de espermatozoides com ZyMot: manuseio da placa microfluídica, incubação da amostra, coleta dos espermatozoides selecionados e comparação com métodos tradicionais
  • Teste de fragmentação do DNA: leitura e interpretação dos resultados